第三节 抗体法检测LDL-R
第三节 抗体法检测LDL-R
Felgines等在研究RICO鼠的肝载脂蛋白时报道了抗体法的应用。
用来源于牛肾皮质的LDL-R免疫兔，得到兔抗牛-LDL-R抗体，离心法收集纯化细胞膜蛋白，点样于硝化纤维膜上，于猝灭液中温育1h，以TTBS洗3次，加入稀释的抗LDL-R抗体血清，再温育90min，TTBS洗后，纤维膜用结合有辣根过氧化物酶的第二抗体羊抗兔-IgG温育1h30min，TTBS洗3次，TBS洗1次，15min后用4-氯-1-奈酚和H[XB]2[/XB]O[XB]2[/XB]显色。
TTBS：Tris-HCL20mM，pH7.5NaCl500mM,Tween200.05%；TBS：Tris-HCL20mM。pH7.5，NaCl 500mM
Felgines等在研究RICO鼠的肝载脂蛋白时报道了抗体法的应用。
用来源于牛肾皮质的LDL-R免疫兔，得到兔抗牛-LDL-R抗体，离心法收集纯化细胞膜蛋白，点样于硝化纤维膜上，于猝灭液中温育1h，以TTBS洗3次，加入稀释的抗LDL-R抗体血清，再温育90min，TTBS洗后，纤维膜用结合有辣根过氧化物酶的第二抗体羊抗兔-IgG温育1h30min，TTBS洗3次，TBS洗1次，15min后用4-氯-1-奈酚和H[XB]2[/XB]O[XB]2[/XB]显色。
TTBS：Tris-HCL20mM，pH7.5NaCl500mM,Tween200.05%；TBS：Tris-HCL20mM。pH7.5，NaCl 500mM